Agro Sur 34(1-2): 63-64 2006

PRESENTACIÓN DE MURALES

 

INVESTIGACIONES PRELIMINARES REALIZADAS EN TORNO AL ESTABLECIMIENTO in vitro DE ESPECIES CHILENAS DE Rhodophiala *

PRELIMINARY RESEARCH ON THE in vitro ESTABLISHMENT OF CHILEAN Rhodophiala SPECIES

 

Jara, G. 1, Seemann, P. 1, Muñoz, M. 1, Riegel, R. 1, Schiappacasse, F. 2, Peñailillo, P. 2 y Vico, V. 2

1 Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile. E-mail: gjara@uach.cl.
2 Departamento de Horticultura, Universidad de Talca, Talca, Chile.
* Trabajo Financiado mediante Proyecto FIA-BIOT-01-A-071.

 

INTRODUCCIÓN

Chile posee una gran diversidad de especies bulbosas endémicas, constituyendo un pool genético que merece ser rescatado y estudiado. Entre estas especies destacan las pertenecientes a la Familia Amaryllidaceae, tales como R. bagnoldii, R. montana, R. splendens y R. rhodolirion, las cuales se distribuyen desde la III a la X región de nuestro país. Son plantas geófitas, que producen hermosas flores de llamativos colores. Las investigaciones realizadas en tomo a esta especie han sido principalmente en torno a estudios citológicos y de multiplicación (Palma-Rojas, 1999) Al igual que otras Amarilidaceas, la propagación a partir de bulbos en forma natural no ha sido un método efectivo, ya que produce escasos bulbillos hijos, con lo cual se han investigado otras alternativas tales como, el seccionamiento y obtención de escamas gemelas, el corte en cruz y el vaciado. La aplicación de técnicas biotecnológicas, mediante la micropropagación, ha sido la más utilizada en la mayoría de las geófitas que se desarrollan comercialmente. En el caso de Rhodophiala, esta técnica ha sido aplicada en R. montana, R. rhodolirion, R. splendens y R. bagnoldii. No obstante lo anterior, se espera que los conocimientos en la micropropagación de otras geófitas sean aplicados exitosamente a las cuatro especies en estudio, de tal forma de elaborar un protocolo para el cultivo in vitro, ya sea mediante la incorporación de material vegetativo o germinación de semillas.

MATERIAL Y MÉTODOS

Los ensayos se realizaron con escamas de bulbos y semillas de R. bagnoldii y R. montana y bulbos in vitro de R. rhodolirion. El establecimiento in vitro se realizó mediante las técnicas de desinfección habituales. Se llevaron a cabo ensayo con escamas dobles, para determinar el efecto de la prevención en la liberación de fenoles, con ácido cítrico/ácido ascórbico (AC/AA), Polivinil Pirrolidona (PVP) y carbón activado, diferentes concentraciones de ANA y citoquininas, carbohidratos, concentraciones de las macrosales del medio MS en combinación con diferentes concentraciones de sacarosa, y con microbulbillos se ensayaron medios de cultivo con reducción de macrosales y diferentes concentraciones de ANA/BAP, mientras que en el caso de semillas se determinó el porcentaje de germinación. Todos los ensayos se incubaron a 16 horas luz, 21°C y un flujo de fotones fotosinteticamente activos de 50 µmol m-2s-1. Las evaluaciones se realizaron a los 30 días de iniciado el cultivo, evaluándose el número y longitud de brotes, hinchamiento de escamas, porcentaje de oxidación, sobrevivencia y porcentaje de germinación.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

El empardecimiento de los explantes se logró controlar en forma significativa mediante la aplicación de carbón activado al medio de cultivo en R. bagnoldii, mientras que en R. montana la respuesta no presentó diferencias significativas entre los tratamientos, no lográndose determinar una respuesta clara en cuanto a la efectividad de los agentes antioxidantes. A pesar de la pérdida de material por oxidación, se logró una tasa de sobrevivencia mayor del 46,7%, después de 30 días de cultivo, sin embargo, la regeneración de brotes fue muy baja, del orden de 1-2 brotes por escama. Esta respuesta, puede explicarse a que la evaluación de las escamas se realizó a los 30 días de incubación y no a los 90 días como lo realizado por otros investigadores.

El efecto de medios con reguladores de crecimiento y carbohidratos, no fue significativo para la brotación y/o bulbificación en las escamas de R. montana. Esta situación también se presentó en R. bagnoldii en medios de cultivo adicionados con carbón activado. A pesar del bajo porcentaje de brotación, las escamas que formaron brotes, se adaptaron a condiciones de cultivo in vitro, aumentado paulatinamente su capacidad de regeneración, como se observa en el Cuadro 2, en donde se alcanzó un porcentaje de brotación de hasta un 55% para R. rhodolirion, activándose además la bulbificación con un máximo de 30% en medio MS normal.

 

Cuadro 1. Prevención de la oxidación y sobrevivencia en escamas de bulbos de R. bagnoldii y R, montana sometidas a diferentes tratamientos.
Table 1. Oxidation prevention and survival on bulb scales of R. bagnoldii and R. montana under different treatments.
 
 
Promedios en una columna seguidos por la misma letra no difieren estadísticamente entre sí. Test de Tukey (p < 0,05). a
Datos representan un promedio de 10 escamas gemelas.

 

 

Cuadro 2. Respuesta morfogénica de bulbillos in vitro de R. rhodolirion.
Table 2. Morphogenic response of R. rhodolirion bulbs in vitro.
 

 

En relación a la germinación in vitro, R. montana presentó una curva más uniforme, con un porcentaje de germinación del 40%; mientras que R. bagnoldii, presentó valores de un 28%, a los 42 días post siembra. Este sistema de propagación ha sido más eficiente permitiendo aumentar notoriamente el banco de germoplasma de las cuatro especies de Rhodophiala en estudio.

BIBLIOGRAFÍA

PALMA- ROJAS, C. 1999. Caracterización citogenética de los géneros Rhodophiala Presl. y Phycella Lindl. (Amaryllidacea). In: Seminario "Los geófitos nativos y su importancia en la floricultura". Fundación para la Innovación Agraria (FIA) y DIUT, Universidad de Talca. 79 p.