Empleo del humor vítreo para la estimación postmortem de la magnesemia en bovinos

C. E. RAMIREZ¹, Dr.; C. M. TITTARELLI¹, M.V.; G. A. MATTIOLI², M.V.; G. E. LASTA¹, M.V.

The diagnosis of hypomagnesemic tetany in cattle is based on the clinical history and on findings of hypomagnesemia. Dead animals show no characteristic lesions and postmortem blood samples are not suitable since Mg leaks from the tissues into the blood during autolisis. Magnesium concentration in vitreous humour (VH) reflects the plasma Mg level, and remains unchanged 48 hs postmortem. Therefore, it can be used for postmortem estimation of magnesemia. In a local slaughterhouse, 196 samples were obtained from steers. An eye and a matching blood sample were obtained from each animal. Magnesium was measured in plasma and VH by atomic absorption spectrometry. Magnesium concentration in VH was above plasma concentration in 84% of the samples. Correlation coefficient between plasma Mg and VH Mg was r: 0.51 (F: 69.93 for 1 and 195 degrees of freedom, p<0.001). The regression formula was Y = 0.541 + 0.395 * X, where Y = VH Mg and X = plasma Mg. Although we recommended to bear in mind that any VH Mg value below 0.831 mm gl/l, would be consistent with plasma Mg levels below 0.741 mmol/l, the use of the regression formula allows only a gross estimation of the plasma Mg levels from VH analysis.

Palabras claves: hipomagnesemia, diagnóstico postmortem, humor vítreo, magnesio.

Key words: hypomagnesemia, postmortem diagnosis, vitreous humour, magnesium.

INTRODUCCION

El humor vítreo (HV) se emplea en la medicina forense para establecer las posibles causas de muerte (Coe, 1969; Sturner y col., 1976). En medicina veterinaria es posible usar esta muestra para el diagnóstico postmortem de tetania hipomagnesémica (TH) en bovinos, enfermedad que causa hasta un 20% de mortalidad en los rodeos afectados (McDowell, 1992). Generalmente la TH se presenta como brotes durante o después de las tormentas, sobre todo en primavera y otoño. Los clínicos veterinarios son consultados debido a la aparición de varios animales muertos, con o sin manifestaciones clínicas previas. Los signos clínicos que presentan los bovinos son hiperexcitabilidad, recumbencia y convulsiones. Cuando se analizan muestras de plasma de animales de ese rodeo se encuentra que el Mg plasmático (MgP) está debajo de 0.741 mmol/l (NCMN, 1973), mientras que los animales muertos no presentan lesiones postmortem que permitan el diagnóstico. Por otro lado, las muestras de sangre obtenidas de animales muertos no sirven para el diagnóstico ya que los tejidos al autolizarse liberan Mg al plasma.
Para el diagnóstico de la TH se recomienda el empleo de líquido cerebroespinal, ya que se demostró que existe una buena correlación entre la concentración de Mg en este líquido y la presentación de signos clínicos (Allsop y Pauli, 1985). En un animal muerto obtener una muestra libre de hemólisis es difícil y carece de valor si se la toma luego de 12 horas. Hay una serie de razones que indican que el HV puede ser una muestra útil para la estimación de la concentración de Mg plasmático antemortem. Tanto el líquido cerebroespinal como el HV se forman por mecanismos activos que emplean a la anhidrasa carbónica, ya que diuréticos como la furosemida reducen la producción de ambos (Coles, 1980; Slatter, 1991). También se comprobó que el HV se recicla totalmente en 15' (Slatter, 1991), por lo que su composición debe reflejar la del plasma, y posee la ventaja de mantener la concentración de Mg estable hasta 48 h postmortem a temperatura ambiente (23° C) (Lincoln y Lane, 1985), por lo que se convierte en una excelente muestra para el análisis forense. Sin embargo, no todos los autores coinciden en el grado de correlación entre el Mg en el HV y en el plasma (Lincoln y Lane, 1985; McLaughlin y McLaughlin, 1987; Wittwer, 1992; McCoy y Kennedy, 1994), y aun en los que informan que existe un buen grado de correlación no se tiene un criterio claro para su empleo como herramienta diagnóstica.

Por este motivo decidimos realizar un ensayo analizando el grado de correlación existente entre la concentración de Mg en HV y en plasma de muestras pareadas obtenidas de matadero, cubriendo un amplio rango de concentraciones de Mg plasmático. Se encontró que el coeficiente de correlación es de r: 0.51, y se elaboró un criterio de diagnóstico para su uso.

MATERIAL Y METODOS

En un matadero local se obtuvieron 196 pares de muestras provenientes de novillos. De cada animal se tomó un ojo y una muestra de sangre de la vena yugular, recibiendo la misma en un tubo libre de cationes con tapón de polietileno y con Na₂EDTA 1 mg/dl. Los ojos se obtuvieron por enucleación 10' después del sacrificio, y se conservaron en bolsas de polietileno a 4° C hasta la extracción del HV. Este último, se recolectó dentro de las 10 h de enucleado el ojo por punción de la cámara posterior, con aguja de 19 g x 1,5", aspirando suavemente el HV con jeringa de 5 ml, obteniendo en cada caso entre 2 y 3 ml. Las muestras de plasma y HV fueron conservadas en viales de polietileno a -20° C hasta el momento de su análisis. El contenido de Mg se midió por espectrofotometría de absorción atómica, después de la dilución de las muestras 1:50 en LaCl₂ al 0.2%, empleando control interno de calidad. Sobre los 196 pares de muestras se calculó el índice de correlación y la fórmula de regresión, con el correspondiente grado de significancia.

RESULTADOS Y DISCUSION

Los resultados de los análisis se informan en el cuadro 1. La concentración de Mg en HV se encontró por encima de la plasmática en el 84% de los casos.

El coeficiente de correlación entre la magnesemia y la concentración de Mg en HV fue de r: 0.51 (F: 69.93 para 1 y 195 grados de libertad, p<0.001). La fórmula de regresión fue Y = 0.541 + 0.395 * X. Donde Y = Mg en HV y X = Mg en plasma. Para un valor plasmático de 0.741 mmol/l, que es considerado el límite inferior de normomagnesemia, corresponde un valor de Mg en HV de 0.831 mmol/l. Aplicando este criterio para el diagnóstico de hipomagnesemia, se calculó que el 75% de las muestras con Mg en HV inferior a 0.831 mmol/l se correspondían con magnesemias inferiores a 0.741 mmol/l (figura 1), mientras que el 68% de las que tenían Mg en HV superior a 0.831 mmol/l se correspondían con Mg plasmáticos superiores a 0.741 mmol/l.

Figura 1. Relación entre los valores de Mg en plasma (MgP) y los de Mg en humor vítreo (MgHV). El 75% de los valores de MgHV inferiores a 0.831 mmol/l coinciden con valores de MgP inferiores a 0.741 mmol/l. El 68% de los valores de MgHV superiores a 0.831 mmol/l coinciden con valores plasmáticos superiores a 0.741 mmol/l.

Relationship between plasma Mg (MgP) and vitreous humour Mg (MgHV). Seventy five percent of MgHV values below 0.831 mmol/l agree with MgP values below 0.741 mmol/l. Sixty eight percent of MgHV values above 0.831 mmol/l agree with MgP values above 0.741 mmol/l.

La concentración de Mg en HV depende, en cierta medida, de la magnesemia, como lo expresa el coeficiente de correlación (r: 0.51), calculado a partir de un amplio rango de magne-semias, ya que no sólo cubrió el rango (0.741/1.316 mmol/l), sino también el correspondiente a hipomagnesemia (<0.741 mmol/l). Para el empleo del HV como muestra diagnóstica se debe recordar que el índice de correlación hallado no explica el 100% de la variación del Mg en HV, por lo que no es un buen índice predictivo de la concentración exacta de Mg plasmático antemortem. Sin embargo, sí es lo suficientemente confiable para predecir si antemortem existían magnesemias por debajo de 0.741 mmol/l, sobre todo cuando se dispone de muestras de varios animales muertos. De acuerdo a Wittwer y col. (1992) esto podría deberse a que el Mg en HV se encontraría en equilibrio con el Mg plasmático iónico que representa sólo el 65% del Mg total.

Nuestros resultados contrastan con los de Lincoln y Lane (1985), ya que no encontraron diferencias apreciables entre las concentraciones de Mg en HV y en plasma, y a pesar de que informan una alta correlación no mencionan dicho índice. Por otro lado, Wittwer y col. (1992) informan un índice de correlación de 0.7218, con concentraciones de Mg en HV significativamente superiores a las plasmáticas, lo que coincide con nuestros resultados.

Las muertes por tetania hipomagnesémica se presentan en forma aguda y el diagnóstico se realiza en la mayoría de los casos a través de la historia clínica, sobre todo en explotaciones extensivas donde puede dificultarse la obtención de muestras de sangre del rodeo afectado. Por este motivo, el empleo del HV, que es de fácil obtención y análisis, permite corroborar el diagnóstico clínico en forma rápida y económica, sobre todo en los casos en que por dificultades operativas no puedan obtenerse muestras de sangre en forma inmediata.

RESUMEN

El diagnóstico presuntivo de la tetania hipo-magnesémica en el bovino se establece en base a la historia clínica y se confirma a través del laboratorio. Los animales muertos no poseen lesiones características demostrables durante la necropsia, y las muestras de sangre obtenidas postmortem carecen de valor diagnóstico, por la liberación de Mg desde los tejidos durante la autólisis. El humor vítreo (HV) obtenido de animales muertos es una muestra valiosa ya que es reflejo de la magnesemia antemortem y permanece sin cambios hasta 48 h postmortem. En un matadero local se obtuvieron de 196 novillos un ojo y una muestra de sangre de cada animal. Se midió el contenido de Mg en el HV y en el plasma, mediante espectrofotometría de absorción atómica. La concentración de Mg en el HV se encontró por encima de la plasmática en el 84% de las muestras. El coeficiente de correlación entre el Mg plasmático y el del HV fue de r: 0.51 (F: 69.93 para 1 y 195 grados de libertad, p<0.001). La fórmula de regresión fue Y = 0.541 + 0.395 * X. Donde Y = Mg en HV y X = Mg en plasma. Según la fórmula de regresión un valor de Mg en HV inferior a 0.831 mmol/1 se corresponde con magnesemias inferiores a 0.741 mmol/l, y si bien esta técnica permite sólo estimaciones groseras de la magnesemia antemortem, es la mejor herramienta diagnóstica de la TH, especialmente cuando se pueden analizar muestras de varios animales.
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Aceptado: 20.11.97.

BIBLIOGRAFIA

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