COMUNICACIONES
1Instituto de Microbiología Clínica,
Facultad de Medicina, Universidad Austral de Chile, Casilla 567, Valdivia,
Chile.
2Instituto de Ciencias Clínicas Veterinarias.
Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Austral de Chile,
Casilla 567, Valdivia, Chile.
SUMMARY
Chronic obstructive pulmonar disease (COPD) of horses is an alergic alteration of lower respiratory tract with obstruction of aerovias and a mucupurolent bronchiolitis, developped by an amount of alergenics.
It is disease of world wide distribution, being more common in warm countries where horses are feeded chiefly with hay & stay stabulated for long periods. In Chile it has been described being more ofter in springtime.
In the present study 99 samples were analysed being of straw, mixed hay & alfalfa coming from 19 Chilean horse breeding grounds of the Valdivia & Osorno provinces in order to determinate the presence of thermophilic fungus & bacteria.
The most isolated fungi were A. fumigatus, Mucor hiemalis & A. niger. Thermophilic bacteria were scarsely. Thermoactinomyces vulgaris & S. rectivirgula.
Palabras claves: Hongos, bacterias termofílicas, COPD, caballos, heno.
Key words: Fungi, Thermophilic bacteria, COPD, Hay, horse.
INTRODUCCION
La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) del equino es una alteración del tracto respiratorio bajo, con obstrucción de las vías aéreas y una bronquiolitis mucopurulenta (Araya, 1994). Se considera una enfermedad de domesticación que afecta a los equinos expuestos a heno y paja de mala calidad (Mc Gorum y Dixon, 1992).
El cuadro se manifiesta principalmente en animales mayores de tres años, aumenta con la edad y pareciera no existir predisposición de sexo o raza (Araya, 1994).
La enfermedad ha sido reconocida en América, Asia, Africa, Nueva Zelanda y Gran Bretaña (Littlejhon, 1979). Según este mismo autor, se estima que en Suiza es ésta la mayor causa de pérdida prematura de la capacidad funcional en la población equina. En Chile también ha sido reportada y aparece especialmente en primavera y verano (Ríos, 1985, Araya y Zaror, 1995). Se presenta en climas templados, donde los caballos se alimentan de preferencia con heno y se mantienen largos períodos estabulados, generalmente en pesebreras pequeñas y mal ventiladas y en las que se utiliza paja como cama (Ríos, 1985). Estos factores posibilitarían una alta polución de alergenos, principalmente de origen fúngico, provocando un estado de hipersensibilidad tipo I (IgE) o de tipo III (IgE e IgG) de Gell y Coobms; actuando estos como principal factor etiológico en la génesis de la enfermedad (Derksen, 1993).
Entre los hongos que se describen con mayor frecuencia como causantes de la enfermedad se destaca Aspergillus fumigatus. Este es un hongo termoresistente, contaminante habitual de heno y paja. Otros agentes importantes son las bacterias ramificadas Saccharopolispora rectivirgula, también llamada Faenia rectivirgula (anteriormente Micropolispora faeni) y Thermoactinomyces vulgaris (Araya y Zaror, 1995). Por otra parte, se han descrito alrededor de 70 especies de hongos contaminantes en establos, los cuales podrían actuar como desencadenantes de la enfermedad (Ríos, 1985).
El diagnóstico de COPD se hace en base a la historia clínica, signos y algunos métodos de laboratorio, siendo el examen de heno y paja de ayuda complementaria (Araya, 1994). Pruebas como la intradermoreacción y desafío con antígenos inhalantes, acompañado de los signos clínicos, sirven para distinguir la enfermedad obstructiva pulmonar de otras patologías, en las cuales la estructura pulmonar está significativamente comprometida, como es el enfisema (Clarke y col., 1987). Una prueba de bastante utilidad es el lavado bronquialveolar, ya que en casos de COPD se encuentra un marcado incremento de neutrófilos en comparación con caballos normales (Tremblay y col., 1993).
El COPD, según registros del Hospital Veterinario de la Universidad Austral de Chile, parece constituir uno de los problemas parcialmente inhabilitantes en caballos de rodeo del Sur del país y en atención a que en Chile no han sido determinados los agentes etiológicos y factores predisponentes, el objetivo de este trabajo es determinar la presencia de hongos y bacterias termofílicas en paja, heno mixto y heno de alfalfa que se emplean en la alimentación y cama de caballos chilenos de las provincias de Valdivia y Osorno.
MATERIAL Y METODOS
Se seleccionaron 22 criaderos de caballos criollos chilenos de las provincias de Valdivia y Osorno (16 de Valdivia y 6 de Osorno), en los cuales existían antecedentes de enfermedades respiratorias crónicas de acuerdo a los registros del Hospital Veterinario de la Universidad Austral de Chile.
De estos criaderos se tomaron 99 muestras de paja, heno mixto y heno de alfalfa (cuadro 1), las cuales fueron recolectadas en bolsas plásticas estériles. Con ellas se procedió al cultivo e identificación de hongos y bacterias termofílicas.
Para el cultivo de hongos, principalmente A. fumigatus, se sembró por impacto de partículas de polvo del pasto, en placas Petri con agar Sabouraud-dextrosado-cloramfenicol. Las placas se incubaron a 28 y 45ºC. durante 5 a 10 días respectivamente, con observación diaria.
Muestras de paja, heno mixto y heno de alfalfa de criaderos de caballoschilenos, según lugar geográfico.
|
|
|||||
|
Lugar geográfico y Nº de muestras ( )
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
Osorno
Río Bueno - La Unión Paillaco - Los Lagos Lanco San José |
(6) |
7 3 3 3 |
14 4 8 3 |
6 8 9 4 |
27 15 20 10 |
|
|
|||||
|
Total
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
| P: paja | Hn: heno mixto | Ha: heno de alfalfa |
Una vez aislados los hongos y las bacterias se procedió a la preparación de microcultivos (Riddel, 1950). Para la identificación se utilizaron criterios y claves de Smith (1963), Von Arx (1970), Barnett (1972), Toussoun y Nelson (1976), O'Donnel (1979), Piontelli (1978), Carmichael y col. (1980), Domsch (1980), Mc Ginnis (1982), Bell (1983), Kern (1985), De Hoog y col. (1993), Kozakiewic (1989), Hanlin (1990), Piontelli (1992), Singleton y col. (1993).
RESULTADOS Y DISCUSION
En las cuadros 2 y 3 se presentan los hallazgos de hongos aislados de paja, heno mixto y heno de alfalfa en criaderos de caballos chilenos de las provincias de Valdivia y Osorno, a 28 y 45ºC. respectivamente.
Porcentaje de hongos aislados a 28ºC de criaderos de caballos chilenos, según lugar geográfico.
| Hongos a 28ºC |
|
San José | Paillaco Los Lagos |
Río Bueno La Unión |
Osorno | |||||
| Nº |
|
Nº | % | Nº |
|
Nº |
|
Nº |
|
|
| A.amstelodami A. flavus A. fumigatus A. nidulans A. niger A. ornatus A. penicilloide A. restrictus A. terreus A. versicolor Alternaria spp. Curvularia spp. Chaetomiumspp. E.amastelodami E. nidulans F. oxysporum M. hiemalis M.circinelloides M. plumbeus Penicillium spp. P. funiculosum P. restrictum Rhizopus spp. R. nigricans S. brevicaulis |
4 2 12 3 5 1 1 1 0 0 0 0 1 1 2 2 12 1 1 2 1 1 5 1 |
6.7 3.4 20.3 5.08 8.5 1.7 1.7 1.7 0 0 0 0 1.7 1.7 3.4 3.4 20,3 1,7 1,7 3,4 1,7 1,7 8,5 1,7 |
0 0 6 3 2 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 2 5 0 0 1 0 0 0 0
|
0 0 28.6 14.3 9.5 0 0 0 4.7 0 0 0 0 0 4.7 9.5 23.8 0 0 4.7 0 0 0 0
|
1 1 10 5 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 5 0 1 0 0 0 1 0 1 |
3.4 3.4 35.5 17.2 13.8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 17.2 0 3.4 0 0 0 3.4 0 3.4 |
5 1 25 6 3 0 0 1 0 1 1 0 0 2 1 0 16 2 0 1 0 2 0 0 0 |
7.46 1.50 37.3 8.95 4.5 0 0 1.5 0 1.5 1.5 0 0 2.9 1.5 0 23.9 2.9 0 1.5 0 2.9 0 0 0 |
4 1 19 4 7 0 0 0 0 1 0 1 0 1 1 1 14 7 0 4 0 0 0 0 0 |
6,2 1,5 29,3 6,2 10,8 0 0 0 0 1.5 0 1.5 0 1.5 1.5 1.5 21.5 10.8 0 6.2 0 0 0 0 0 |
| Total | 59 | 100 | 21 | 100 | 29 | 100 | 67 | 100 | 65 | 100 |
|
|
F.: Fusarium | M.: Mucor | S.: Scopulariopsis |
| E.: Emericella | P.: Penicillium | R.: Rhizopus |
| Hongos a 45ºC |
|
San José | Paillaco Los Lagos |
Río Bueno La Unión |
Osorno | |||||
| Nº |
|
Nº | % | Nº |
|
Nº |
|
Nº |
|
|
| A.amstelodami A. flavus A. fumigatus A. nidulans A. niger A. Terreus B. piluliferum Humicola grisea M. hiemalis Penicillum spp. Rhizomucor spp. Rhizopus spp. R. nigricans |
0 0 18 i 0 2 1 1 14 2 0 2 2 |
0 0 43.9 2.4 0 4.9 2.4 2.4 34.1 4.9 0 0 4.9 |
0 0 10 1 0 0 0 0 5 2 0 0 1 |
0 0 52.6 5.3 0 0 0 0 26.3 10.5 0 0 5.3 |
0 1 12 2 0 0 0 0 8 1 0 1 0 |
0 4 48 8 0 0 0 0 3.2 4 0 4 0 |
1 0 27 1 0 1 0 0 12 0 0 2 1 |
2.2 0 60 2.2 0 2.2 0 0 26.7 0 0 4.4 2.2 |
0 0 22 0 1 0 0 0 12 0 2 0 1 |
0 0 55 0 2.5 0 0 0 30 0 5 0 2.5 |
| Total | 41 | 100 | 19 | 100 | 25 | 100 | 45 | 100 | 40 | 100 |
| A.: Aspergillus | R.: Rhizopus |
| B.: Botryotrichum |
M.: Mucor |
En la cuadro 4 se presentan los aislamientos de bacterias termofílicas a 28 y 45ºC. Se observa un escaso aislamiento de S. rectivirgula y T. vulgaris.
| Bacterias |
Río Bueno |
|
Los Lagos |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
| S.rectivirgula h. vulgaris Streptomyces spp. |
0 24 |
0 9 |
0 8 |
1 1 |
0 0 |
0 3 |
| S.: Saccharopolispora
Th.: Thermoactinomyces |
Madelin y col. (1991) al examinar polvo del aire de establos en Inglaterra determinaron un gran número de esporas de Aspergillus, Penicillium, actinomicetales, otras bacterias y otros elementos no clasificados. Madelin y col. (1979) encontraron que la cantidad de unidades formadoras de colonias fúngicas viables no está relacionada con la proporción del material fúngico del aire. Por otra parte, Clarke (1987) y Clarke y col. (1987) indican que, aunque A. fumigatus es el hongo más frecuentemente encontrado en piensos, los caballos están expuestos a alergenos respiratorios. Recientemente Araya y Zaror (1995) reportaron un gran número de esporas de hongos y ácaros en muestras de paja y heno en los mismos criaderos incluidos en el presente trabajo.
Las taxas predominantes en este estudio fueron hongos de vegetales, lo que indicaría que probablemente el material de cama y de alimentación de los caballos son cosechados y conservados en condiciones favorables para el desarrollo de estos, a lo que contribuiría además la alta humedad del Sur de Chile.
El animal al estar en contacto con esporas puede desarrollar una respuesta respiratoria caracterizada por un cuadro de hipersensibilidad tipo I (IgE) o de tipo III (IgE e IgG) de Gell y Coombs (Roger, 1985). Los principales agentes desencadenantes de hipersensibilidad varían según lugar geográfico, estación del año y tipo de establo (Beech, 1991).
Causales comunes de hipersensibilidad respiratoria en caballos con COPD son S. rectivirgula y A. fumigatus. En el Norte de Inglaterra S. rectivirgula ha sido considerada el principal agente (Mc Pherson y Thompson, 1983). En Chile deben desarrollarse mayores estudios, ya que si bien se aisló, fue muy escasa su presencia (cuadro 4). Otro agente considerado como causal de COPD ha sido T. vulgaris (Woods, 1993), microorganismo que se encontró en una sola ocasión en esta investigación (cuadro 4).
El escaso aislamiento de bacterias termofílicas en esta oportunidad estaría probablemente influenciado por factores tales como, tipo de trabajo que realiza el animal, ambientes mal ventilados, tipo de alimentación, tipo de cama, edad (Mc Pherson y col., 1979 y Mac Pherson y col., 1979), metodología usada y bajo número de caballos estudiados.
Estudios posteriores, en especial de hipersensibilidad permitirían establecer con mayor precisión el rol de las especies de hongos y bacterias encontradas.
RESUMEN
La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) del equino es una alteración alérgica del tracto respiratorio bajo, con obstrucción de las vías aéreas y una bronquiolitis mucopurulenta, desencadenada por diversos alergenos. Es una patología de distribución mundial, geográficamente es más común en países templados donde los equinos se alimentan en base a heno y se mantienen estabulados por largos períodos. En Chile, la enfermedad ha sido descrita y se presenta especialmente en primavera.
En el presente estudio se analizaron 99 muestras de paja, heno mixto y heno de alfalfa provenientes de 19 criaderos de caballos chilenos de las provincias de Valdivia y Osorno con el objeto de determinar la presencia de hongos y bacterias termofílicas.
Los hongos más aislado fueron A. fumigatus. De las bacterias
termofílicas se aisló escasamente Thermoactinomyces vulgaris
y S. rectivirgula.
______________________________________________
Aceptado: 02.03.99.
* Trabajo financiado
con fondos del Proyecto FONDECYT
1930379
BIBLIOGRAFIA
ARAYA O. 1994. Enfermedad pulmonar crónica del cabalo, Revista Vet. y Zootec. de Caldas 7(3): 12-20.
ARAYA O., L. ZAROR. 1995. Determinación de esporas de hongos y ácaros de vida libre en heno y paja en criaderos de caballos chilenos, Arch. Med. Vet. 28(2): 41-44.
BARNETT H.L., B.B. HUNTER. 1972. Illustrated genera of imperfecti fungi, 4ª ed. Mcmillan Publishing Company, New York.
BELL A. 1983. Dung fungi and illustrated guide to coprophilous fungi in New Zealand. Victoria University Press.
BEECH J. 1991. Chronic obstructive pulmonary disease, Vet. Clin. North. Am. Equine Pract. 7: 79-91.
CARMICHAEL J.W., W.B. KENDRICK, I.L. CONNERS, L. SINGLER. 1980. Genera of hypomyetes, The University of Alberta Press, Canadá.
CLARKE A.F. 1987. Stable environment in relation to the control of respiratory disease. In: Horse management. Second edition. Edited by John Hickman. London, Academic Press.
CLARKE A.F., T.M. MADELIN, R.G. ALLPRES. 1987. The relationship of airhigiene in stables to lower airway disease and pharingeal lymphoid hyperplasia in two groups of througbred horses. Eq. Vet. J. 19:524-530.
________. DE HOOG G.S., C.S. TAN, WINTERMANS, J. GUARRO. 1993. C.B.S. course in vertebrate micopathology. 3ª ed. Centralbureau Voor Shimmelculture.
DERKSEN F.J. 1993. Chronic obstructive pulmonary disease (heaves) as an inflamatory condition, Equine Vet. J. 25: 257-258.
DOMSH K.H.W., W. GAMS, T.H. ANDERSON. 1980. Compendium of soil fungi, Vol. 1, Academic Pres, New York.
HALLIWELL R.E.W., J.B. FLEISCHMAN, M. MACKAY-SMITH, J. BEECH, D.E. GUNSON. 1979. The role of allergy in chronic pulmonary disease of horse. Javma 174: 277-281.
HANLIN R.T. 1990. Illustrated genera of ascomycetes APS. Press.
KERN M.E. 1985. Medical Mycology. A self-instructional text. F.A. Davis Campany. Philadelphia.
KOZAKIEWICS Z. 1989. Aspergillus species on stored products. C.A.B. International Micological Institute. UK.
LITTLEJOHN A. 1979. Chronic obstructive pulmonary disease in horses, The Vet. Bull. 49: 907-915.
MADELIN T.M., A.F. CLARKE and T.S. MAIR. 1991. Prevalence of serum pricipitating antibodies in horses to fungal and thermophilic actinomycete antigens effects of environmental challenge. Equine Vet. J. 23:247-252.
Mc GINNIS M.R., R.F. D'AMATO, G.A. LAND. 1982. Pictorial Handbook of medically important fungi and aerobic actinomycetes. C.B.S. Educational and Professional Publishing New York.
Mc GORUM B.C., P.M. DIXON. 1992. Preliminary observations on inhalation and intradermal challenges of horses with oil seed rape, Vet. Record. 131: 163-167.
Mc PHERSON E.A., J.R. THOMSON. 1993. Chronic obstructive pulmonary disease in the horses I. Nature of the disease, Equine Vet. J. 15: 203-206.
Mc PHERSON E.A., G.J.K. LAWSON, J.R. MURPHY, J.M. NICHOLSON, R.G. BREEZE, H.M. PIRIE. 1979. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) in horse: actiological studies responses to intradermal and inhalation antigenic challenge, Equine Vet. J. 11: 159-166.
Mc PHERSON E.A., G.H.K. LAWSON, J.R. MURPHY, J.M. NICHOLSON, R.G. BREEZE, H.M. PIRIE. 1979. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD): factors influencing the ocurrence, Equine Vet. J. 11: 167-171.
O'DONNEL K.L. 1979. Zygomycetes in culture. Department of Bot. University of Georgia.
PIONTELLI E., M.A. TORO. 1992. Manual de identificación para microhongos comunes en alimentos. Universidad de Valparaíso.
PIONTELLI E., M.A. TORO. 1978. Temas de micología. Fac. Med. Universidad de Valparaíso.
RIDDEL R.W. (1950). Permanents stained micological preparations obtained by slide culture, Micologica 43: 265-270.
RIOS A. 1985. Enfermedad pulmonar crónica obstructiva del caballo, Monografías Medicina. Vet. 7: 35-42.
ROGER M. 1985. Chronic obstructive pulmonary disease in horses- Part I., Vol. 7, Nº 7:407-413.
SMITH G. 1963. Introducción a la micología industrial. Edwars Arnold. London, Inglaterra.
SINGLETON L.L., J.D. MICHAEL, Ch.M. RUSCH. 1993. Methods for research on soilborne phythogenic fungi. 2ed. A.P.S. Press.
TOUSSOUN T.A., P.E. NELSON. 1976. Fusarium. 2ed. University Park, Pennsylvania.
TREMBLAY G.M., C. FERLAND, J.M. LAPDINTE, A. VRINS, J.P. LAUDIE, Y. CORMIER. 1993. Effect of stabling on bronchoalveolar cells obtained from normal and COPD horses, Equine Vet. J. 25: 194-197.
VON ARX J.A. 1970. The genera of fungi sporulating in pure culture, Verlag Von J. Cramer, Alemania.