Hibridación in situ del virus respiratorio syncytial bovino en pulmón de cordero a diferentes tiempos postinfección

Resumo

Se estudió, mediante la técnica de hibridación in situ, la distribución del ARN viral del virus respiratorio Sincicial Bovino (VRSB) en pulmón de corderos infectados en forma experimental, a diferentes tiempos postinoculación. La sonda usada para la hibridación in situ se preparó mediante transcripción reversa del ARN del VRSB, seguida de la amplificación mediante PCR de cADN. 25 corderos de raza Merino de ambos sexos y de un peso vivo de 55 (+/- 10) Kg, fueron inoculados por vía intratraqueal con 40 ml de solución salina que contenía 1.26 x 10⁶ DIM₅₀ por ml (cepa viral NMK7). Los corderos se sacrificaron los días 1, 3, 7, 11 y 15 postinoculación. Las células epiteliales bronquiales y bronquiolares resultaron positivas a los ácidos nucleicos de VRSB los días 1, 3, 7 y 11 postinoculación. A su vez, el epitelio alveolar contenía células positivas los días 1, 3, y 7 postinoculación. Se detectaron células que contenían el ARN viral en las luces bronquiales y bronquilares del día 1 al 11 postinoculación, y en el exudadado alveolar en los días 3 y 7 postinoculación. Se identificaron señales positivas de hibridación desde el día 3 al 11 postinoculación, tanto en las células intersticiales mononucleares como en el tejido linfoide asociado a los bronquios. Las señales de hibridación más intensas se detectaron a los días 3 y 7 postinoculación, lo que coincidió con las lesiones histopatológicas de mayor consideración.