Desarrollo y validación de un enzimoinmunoensayo para el diagnóstico de Leptospirosis bovina

Resumo

La leptospirosis es una zoonosis de distribución mundial que afecta a los animales y al hombre. En el ganado bovino causa numerosas pérdidas económicas. El diagnóstico de laboratorio se basa generalmente en la serología. La técnica serológica de referencia internacional es la aglutinación microscópica (MAT). El objetivo de este trabajo fue desarrollar un ELISA para la determinación de anticuerpos específicos IgG anti-leptospiras en sueros bovinos y validarlo frente a la técnica de referencia (MAT). Los sueros fueron evaluados por MAT, utilizando 8 serovares de Leptospira interrogans. Para el ELISA, se utilizó como antígeno el extracto sonicado de un cultivo serovar hardjo (cepa Hardjoprajitno). Se evaluaron 535 sueros de bovinos, 356 MAT positivos y 179 MAT negativos. Al valor de corte óptimo recomendado por la curva ROC, la sensibilidad del ELISA frente a la MAT fue de 99.4% (IC 95%= 98.0-99.9) y la especificidad de 96.1% (IC 95%= 92.1-98.4), con un kappa de 0.96 (p<0.001). El valor de área bajo la curva ROC fue de 0.995 (IC 95%= 0.984 - 0.999), lo que indicó una alta confiabilidad del ELISA. En zonas donde se desconocen los serovares prevalentes o existen varios serovares circulantes, este ELISA presentaría la ventaja respecto de las técnicas serovar-específicos, ya que puede detectar infección mediante la aplicación de un solo ensayo, utilizando material no infectivo. Este ensayo es además repetitivo, de interpretación objetiva y simple de implementar en laboratorios no especializados. En conclusión, este ELISA IgG género específico desarrollado podría ser una alternativa útil para el diagnóstico de bovinos infectados con leptospiras.