Identificación de di- y triploidización por análisis multiparamétrico de imágenes: Un nuevo método para la cuantificación de la tasa de triploidización en trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss)

Resumo

La creciente competencia internacional ha forzado a la industria del salmón a la incorporación de técnicas innovadoras. El cultivo de hembras triploides tiene múltiples ventajas sobre poblaciones diploides. En la actualidad, no existe un método simple, exacto y de bajo riesgo para la cuantificación de tasas de triploidización. En este trabajo presentamos un método que combina microscopía de campo claro convencional (con marcación GIEMSA) con el análisis multiparamétrico de imágenes, denominándolo como microscopía morfológica cuantitativa (QMM). Se utilizó citometría de flujo (FC) como un método de referencia para determinar el contenido de ADN en eritrocitos diploides y triploides extraídos de truchas arco iris inmaduras (Oncorhynchus mykiss). Además, se aplicó microscopía de fluorescencia cuantitativa (QFM), usando los marcadores de ADN: 4,6-diamidina-2-fenilindol (DAPI), Yoduro de Propidio (PI), y Naranja de Acridina (AO). Nuestros datos muestran que QMM posee una capacidad discriminante comparable o incluso superior a FC o QFM. El método desarrollado ofrece una nueva perspectiva para clasificar objetos microscópicos, con muchas posibles aplicaciones.