Multiplicación in vitro de Eucalyptus globulus mediante sistema de inmersión temporal

Resumo

Con el objeto de establecer metodologías de masificación de Eucalyptus globulus se analizaron factores que afectan la multiplicación in vitro de esta especie mediante el sistema de inmersión temporal. Para ello se dispusieron cinco microtallos por frasco, conteniendo 250 mL de medio Murashige y Skoog. Se estudiaron la frecuencia de inmersión (6, 12, 24, 48 h), tiempo de inmersión (1, 2 y 3 min) y concentración de macronutrientes (25, 50, 100 %). También se estudió el efecto de la adición al medio de cultivo de 6-bencilaminopurina (0, 2,2 y 4,4 µM), polivinilpirrolidona (0, 250 y 500 mg L^-1) y concentración de sacarosa (43,8 y 87,6 mM). En cada ensayo se realizó un diseño completo aleatorio con arreglo factorial con tres repeticiones. Se evaluó número de brotes nuevos por frasco, razón de masa seca/masa fresca, pH final del medio de cultivo y porcentaje de brotes hiperhidratados. El tratamiento que presentó una mayor generación de brotes y menor hiperhidratación fue obtenido con un tiempo de inmersión de dos minutos, frecuencia cada 12 horas, concentración de macronutrientes al 50 %, 43,8 mM de sacarosa, 2,2 µmol de 6-bencilaminopurina y 250 mg L^-1 de polivinilpirrolidona. La tasa de multiplicación de microtallos de E. globulus es significativamente mayor al aumentar el tiempo de inmersión de 1 a 2 minutos, así como al suplementar el medio de cultivo con 4,4 µM de 6-bencilaminopurina. Por otra parte, la tasa de multiplicación decae si la frecuencia de inmersión disminuye de ciclos cada 12 h a ciclos cada 48 h. Finalmente, la hiperhidratación de los tejidos aumenta al elevar la concentración de los macronutrientes y sacarosa, sin ser afectada por el nivel de antioxidante agregado al medio.